| 品牌：中科金研 | 是否进口：否 | 产地：北京 |
| 主要用途：各类下游分子生物学实验 | 产品名称：PCR产物纯化磁珠试剂盒 | 产品特性：磁珠试剂盒 |
| 包装规格：100T | 是否危险化学品：否 | 有效成分含量：其它% |
本试剂盒采用具有分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化高质量基因组DNA。经过特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂，安全、便捷且提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA在A260/A280的紫外吸收均在1.7~2.0之间，可以应用到各类下游分子生物学实验。
货号 | 名称 | 规格 |
MB60909-10 | PCR产物纯化磁珠试剂盒 | 100T |
适用范围
从PCR产物中提取基因组DNA，适用于核酸自动化提取平台。
试剂盒包装及组成
试剂盒组成 | 数量 |
裂解液S1 | 50ml*1 |
裂解液S2 | 20ml*1 |
结合液 | 50ml*1 |
磁珠 | 3.5ml*1 |
洗脱液 | 20ml*1 |
使用说明书 | 1份 |
注意事项
1、磁珠使用定要充分混匀。
2、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可在裂解时加1μl RNaseA（10mg/ml）。
3、如果是组织难以消化，适当延长裂解时间或将组织碾磨后裂解。
4、如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数（洗脱次数不要超过3次），也可以适当延长裂解时间。
5、取材量参照下面表格
操作步骤
1、裂解
取PCR产物100uL加入480μl裂解液S1、120μl裂解液S2、20μl蛋白酶K（客户自备），研磨均匀，然后转移至1.5ml EP管中，吹打或点阵混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中65℃温育15～30min。
2.结合
将EP管从温育设备中取出，12000rpm离心10min。取500 μl上清，加入振荡混匀的磁珠30μl、500μl结合液，颠倒混匀2min，时文静置1min。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液（注意吸净管盖及管底残液）。
3.洗涤
⑴加入600μl 70%乙醇，吸打或点振5～10次，然后磁分离，注意吸净管盖及管底的残液；
⑵重复步骤⑴一次，室温下开盖干燥10-20min或恒温箱（不高于55℃）内开盖干燥5min，注意防止污染。
4.洗脱
加入100μl洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2～3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，即可进行下游实验。
常见问题及参考意见
得率低
（1）样品提取前可能已经降解，建议使用合理的保存条件；
（2）结合不充分；
结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态，并且充分颠倒混匀；
（3）取样量大于说明书给出量；
取样量请严格按照说明书操作。
条带弥散
（1）样品不新鲜或反复冻融多次：尽量用新鲜样品进行试验，如果样品需要保存，可根据试验，分装保存样品，尽量避免反复冻融；
（2）研磨时间太长，造成核酸降解：请研磨尽量迅速，防止DNA降解；
（3）环境温度太高：可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨，如果所提取材料基因组极易降解，可用液氮研磨；
（4）裂解时间太长：裂解时间不要超过60min；
（5）提取后模板DNA放置时间太长：提取后如有需要，请尽量及时进行电泳试验。短期内可置于4℃保存，长期请置于-20℃保存（尽量注意避免反复冻融）。
DNA液有颜色
（1）洗涤过程不充分：如果结合后磁珠呈团状、丝状或颗粒状，要增加点震力度及次数，充分吹打混匀。
（2）裂解不充分：将组织充分研磨、适当增加裂解液S1和S2用量，也可以延长裂解时间。
（3）样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整：严格按照说明书操作，如果需要增大样本量，可以等比例增大裂解液S1、S2、蛋白酶K以及磁珠用量，其他试剂用量可不改变。
DNA样品不纯，干扰后续实验
（1）DNA液有乙醇残留：洗涤时，请注意吸净管盖及管底的残液。此外，磁珠应完全干燥，无乙醇残留。
（2）磁珠洗涤不充分：加入70%乙醇时，请吸打或点振混匀。如有必要，可增加一次洗涤步骤。
（3）DNA液中吸入磁珠：如果不小心吸入磁珠，请将上清液返回原管，待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10，000rpm离心2min，再取上清。
（4）DNA液中含有蛋白质等杂质：建议适当减少样品用量。
（5）DNA液中含有轻微盐离子等杂质，此为TE保存液正常现象，不影响下游实验。如有特殊需要，可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验，可将获得的DNA液置于-20℃环境分装保存。
